一、不銹鋼發(fā)酵罐滅菌前準備與設備檢查
 

　　設備完整性檢查
 

　　檢查罐體、攪拌槳、傳感器接口等部位是否有裂縫、變形或泄漏風險。
 

　　確保焊接部位密封性良好，避免滅菌過程中出現(xiàn)泄漏。
 

　　接口與閥門檢查
 

　　檢查進料口、出料口、通氣口、溫度傳感器接口、pH值傳感器接口等連接牢固，無松動或破損。
 

　　確保所有閥門(如進料閥、出料閥、排氣閥)開閉狀態(tài)正常，密封性能良好。
 

　　電源與輔助系統(tǒng)檢查
 

　　檢查電源、空壓機、微機系統(tǒng)和循環(huán)水系統(tǒng)是否正常工作。
 

　　確保水壓、電壓、氣壓正常供應，進水壓維持在0.12MPa，允許在0.15-0.2MPa范圍變動，不能超過0.3MPa，溫度應低于發(fā)酵溫度10℃；單相電源AC220V±10%，頻率50Hz，罐體可靠接地；輸入蒸汽壓力應維持在0.4MPa，進入系統(tǒng)后減壓為0.24MPa；空壓機壓力值0.8MPa，空氣進入壓力應控制在0.25-0.30MPa。
 

　　二、滅菌操作
 

　　罐體滅菌
 

　　根據(jù)需要將培養(yǎng)基配入罐體，按要求封好后，小型發(fā)酵罐(5L)可將罐體放入大殺菌鍋殺菌(115℃，30分鐘)；大型發(fā)酵罐(10L及以上)采用蒸汽殺菌(121℃，30分鐘)。
 

　　滅菌過程中，確保罐內各個部位都能充分接觸到蒸汽，避免出現(xiàn)消毒死角。
 

　　滅菌后冷卻
 

　　消毒完成后，讓發(fā)酵罐自然冷卻或者通過適當?shù)睦鋮s裝置冷卻至合適的發(fā)酵溫度。
 

　　三、參數(shù)校準與設備調試
 

　　溫度傳感器校準
 

　　使用標準溫度計進行校準，將傳感器測量值與標準溫度計的測量值進行對比，調整傳感器的參數(shù)，使其測量誤差在允許范圍內。
 

　　pH值傳感器校準
 

　　使用標準的pH緩沖液進行校準。一般有兩種緩沖液，pH值分別為4.0和7.0。先將傳感器浸泡在pH7.0的緩沖液中，調整傳感器的讀數(shù)至7.0，然后再將傳感器浸泡在pH4.0的緩沖液中，根據(jù)傳感器的反應再次調整參數(shù)，確保pH值測量的準確性。
 

　　溶氧電極校準
 

　　在確定的轉速和通氣量下對溶氧電極進行斜率標定，設定溶氧電極為100%。
 

　　攪拌系統(tǒng)調試
 

　　檢查攪拌槳是否安裝正確，攪拌軸是否能夠靈活轉動，電機及傳動部件是否正常，有無異常聲響。
 

　　啟動反應器攪拌馬達，調轉速100~200Rpm，確保攪拌系統(tǒng)運行平穩(wěn)。
 

　　四、接種與發(fā)酵過程控制
 

　　接種操作
 

　　在培養(yǎng)基加入并達到合適的溫度、pH值等條件后，進行接種操作。將適量的微生物種子液通過接種口緩慢加入發(fā)酵罐，接種量根據(jù)不同的發(fā)酵工藝和微生物種類而定，一般在5%-10%左右。
 

　　接種過程要嚴格遵循無菌操作原則，防止雜菌污染?？梢酝ㄟ^在接種口周圍使用火焰滅菌或者紫外線滅菌等方式保持接種環(huán)境的無菌狀態(tài)。
 

　　發(fā)酵過程參數(shù)控制
 

　　溫度控制：通過安裝在發(fā)酵罐上的溫度控制裝置，如夾套冷卻系統(tǒng)或者加熱系統(tǒng)，將發(fā)酵溫度控制在適宜的范圍內。如果溫度過高，可以通過夾套中的冷卻水循環(huán)降低溫度；如果溫度過低，則可以通過加熱裝置進行升溫。
 

　　pH值控制：根據(jù)微生物的生長特性和發(fā)酵要求，使用酸或堿溶液進行調節(jié)。當pH值升高時，可以加入適量的酸性溶液，如稀鹽酸；當pH值降低時，可以加入堿性溶液，如氫氧化鈉溶液。
 

　　溶氧控制：通過溶氧電極實時監(jiān)測溶解氧濃度，通過調節(jié)通氣量和攪拌速度來維持溶解氧在合適的水平。
 

　　壓力控制：發(fā)酵罐維持正壓既可以杜絕由于罐壓為零時造成的染菌，還可增加氧在培養(yǎng)液中的溶解度，有利于菌的生長及合成。在發(fā)酵培養(yǎng)期間，罐內壓力基本可以保持恒定。然而，在滅菌降溫的過程中，為避免負壓吸入環(huán)境的非潔凈空氣以及負壓可能將罐體吸癟情況的發(fā)生，需要通入一定的空氣保壓。
 

　　五、不銹鋼發(fā)酵罐發(fā)酵結束與設備清洗

 

　　發(fā)酵結束與設備清洗
 

　　發(fā)酵結束后，首先關閉通氣系統(tǒng)和攪拌裝置。然后打開出料閥，將發(fā)酵液通過出料口放出。出料過程要盡量平穩(wěn)，避免發(fā)酵液濺出。
 

　　發(fā)酵液出料后，立即對發(fā)酵罐進行清洗。先用清水沖洗掉罐內殘留的發(fā)酵液和雜質，然后可以使用適當?shù)那逑磩┻M行清洗，以去除附著在罐壁和內部部件上的污垢和微生物。清洗后，再用清水沖洗干凈，確保清洗劑無殘留。
 

　　檢查攪拌裝置、閥門、傳感器等部件的磨損情況，如有損壞或者磨損嚴重的部件，及時進行更換。對發(fā)酵罐的外觀進行清潔和保養(yǎng)，防止罐體生銹。將發(fā)酵罐放置在干燥、通風良好的環(huán)境中，避免受潮和受到其他腐蝕性物質的侵害。